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CAS RN: | 製品コード: A3331

AOL-LecBeads [for Fucα(1-6)/α(1-4)/α(1-3)/α(1-2)]


純度(試験方法):
別名:
  • AOL-レックビーズ [for Fucα(1-6)/α(1-4)/α(1-3)/α(1-2)]
  • AOL-アガロース
  • ニホンコウジカビ由来レクチンアガロース
  • AOL-Agarose
  • Aspergillus oryzae lectin (= AOL)-Agarose
ドキュメント:
1VIAL
¥54,000
4   1   お問い合わせ

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・弊社では常に保管条件を最適化するための見直しを行っています。最新の製品保管条件はホームページ上に記載されたものとなりますので,ご了承ください。


Note:

Product Information
Product code: A3331
Product name: AOL-LecBeads [for Fucα(1-6)/α(1-4)/α(1-3)/α(1-2)]
Preparation: AOL is covalently coupled with agarose gel
Quantity: 0.5 ml gel/1 ml (1:1, v/v slurry) suspended in PBS, pH6.5
Protein concentration: about 15 mg/ml gel
Binding capacity: >5 mg of glycoprotein (human Lactoferrin) /ml gel
Preservative: 0.02% [w/v] Sodium azide
Stabilizer: None

Description
The AOL is an Aspergillus oryzae recombinant of carbohydrate-binding protein (Lectin) derived from Aspergillus oryzae (The AOL gene is derived from the same origin as the host cell). This lectin preferably binds to [Fucα(1-6)/α(1-4)/α(1-3)/α(1-2)] glycan epitopes.
The LecBeads is a lectin-immobilized agarose which is capable of capturing glycoproteins via binding to its specific epitope(s), and it is prepared by a covalent coupling method between lectin and agarose.
The Lectin-catch method using LecBeads (as shown in Application tab) is available for selective separation of glycoconjugates (glycoproteins, glycolipids, and so on). This AOL-LecBeads (0.5 ml gel) shows a binding capacity of about 2.5 mg or more human Lactoferrin [hLF] through its binding to a terminal [Fucα(1-6)/α(1-3)] glycan epitopes on hLF.

Storage
Store at 2-10°C. (Avoid freezing).

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製品コード A3331
等級 SU
物理的状態(20℃) 液体
保管温度 0-10°C
避けるべき条件
規格表
外観 白色~ほとんど白色透明液体~濁った液体
濃度(ローリー法) 13.0 mg/mL gel以上
結合能 試験適合(5 mg/mL gel以上、Human Lactoferrin)
物性値(参考値)
GHS
法規情報
輸送情報
利用例
The lectin-catch procedure

< Preparation >
Buffers
Binding buffer : PBS pH7.5
Elution buffer : PBS pH7.5 containing 200 mM L-fucose [Product code: F0065] and 0.1% triton-X100 [Product code: P1775]

< Method of the lectin-catch > ※Centrifuge method

Equilibration

  • Prepare the LecBeads in a new tube.
  • Add the Binding buffer into the tube to equilibrate the gel.
  • Centrifuge the tube at 800 ×g for 3 min and discard the supernatant. (If necessary, repeat equilibration with the Binding buffer >10-fold volume of the LecBeads appropriately.)

Binding

  • Concentrate or dilute the glycoprotein sample to moderate concentration (e.g., 1 mg/ml) with the Binding buffer [Input fraction], and apply the prepared sample to the tube in which the LecBeads was preliminary equilibrated.
  • Agitate the tube at 4°C (※Generally, a dissociation constants (Kd value) of lectins are tend to be decreased at lower temperature) for a few hours (or overnight).
  • Centrifuge the tube at 800 ×g for 3 min and remove the supernatant [Through fraction].
  • Wash the LecBeads by 5 (to 10)-fold of the slurry volume with the Binding buffer several times.


Elution

  • Elute the glycoprotein from the LecBeads by agitation with an appropriate volume of the Elution buffer (e.g. same volume of the LecBeads).
  • Agitate the reaction tube at 4°C or R.T. for a few hours (or overnight).
  • Centrifuge the tube at 800 ×g for 3 min and remove the supernatant [Elution fraction].
  • Check the resulting fractions ([Input fraction] [Through fraction] [Elution fraction]) by protein assay and SDS-PAGE. (In some cases, the repetitive elution step with a small volume of the Elution buffer might improve the elution effect. If necessary, repeat elution steps.)
  • The competitive oligosaccharide included in the obtained elution fractions can be removed by ultrafiltration or dialysis using a sufficient amount of buffer.

 

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